Пцр мочи на туберкулез


Анализ мочи на туберкулез: метод ПЦР, преимущества, недостатки

Свернуть

Если Манту дала плохой результат прибегают к дополнительным методам диагностики. Главное выявить заболевание, а вопрос о том, сколько диагностическое обследование стоит, отходит на задний план. К одному из самых точных и разрешенных в любом возрасте относится ПЦР. Анализ мочи на туберкулез данным способом выявляет МКБ сразу же после их попадания в организм. Что собой представляет методика и в чем ее преимущества?

Что такое анализ мочи методом ПЦР?

Полимеразная цепная реакция руководствуется принципом молекулярной биологии. Чтобы исследовать урину (или другой биоматериал) используют специальные ферменты. Они могут копировать ДНК микроорганизмов. Специалисты сравнивают материал с имеющейся базой и определяют, есть ли заражение. В случае положительного ответа выясняется степень инфицирования и тип возбудителя.

Тут важна точность, поэтому работники лаборатории должны иметь соответствующие знания и навыки.

Кроме туберкулеза с помощью ПЦР диагностируют и другие инфекционные болезни (гепатит, ИППП, ВИЧ, кандидоз, боррелиоз и др.).

Некоторые родители уверены, что такой метод можно использовать вместо Манту, но это не так. Даже его высокоэффективность не может заменить пробу, которая является утвержденной и обязательной во всех дошкольных и школьных учреждениях. Предоставления в детский сад или школу результата ПЦР может быть недостаточно для допуска ребенка в детский коллектив.

к содержанию ↑

Эффективен ли данный метод при диагностике туберкулеза?

ПЦР мочи на туберкулез эффективный способ выявления патологии, но иногда бывают ложные результаты по отношению к маленьким детям. В этом случае наблюдаются неточности, так как в урине много примесей. Иногда для достоверности и подтверждения диагноза проводятся дополнительные обследования.

Насколько подходящий этот метод в конкретном случае подскажет фтизиатр. Именно у этого специалиста предварительно нужно пройти консультацию.

к содержанию ↑

Противопоказания к методу

Какие-либо противопоказания отсутствуют. Делать анализ разрешено:

  • у детей;
  • при ОРЗ, ОРВИ, ГРИПпе, кори и пр.;
  • во время аллергий и др.

Нецелесообразно проводить возрастной категории от 0 до 3-ех лет из-за получения недостоверных результатов.

Данный метод обследования выбирают чаще других из-за отсутствия в нем противопоказаний и высокого процента получения достоверных результатов.

к содержанию ↑

Преимущества

Практика показывает, что метод оправдывает свою стоимость. Плюсы ПЦР мочи:

  • чтобы вынести «вердикт» не нужно вводить в организм никакие препараты, так как анализ производят в пробирке в условиях лаборатории;
  • безболезненный;
  • для получения результатов не нужно ждать несколько дней, достаточно считанных часов, максимум одного дня (чего нельзя ожидать, если делать посев мочи);
  • выявляет возбудитель даже тогда, когда другие методы не принесли результата;
  • обнаружить болезнь можно на ранней стадии;
  • анализ высокочувствителен, поэтому пропустить туберкулез сложно;
  • ложные результаты наблюдаются редко (обычно вина некомпетентности медработника или неправильный сбор урины самим пациентом);
  • инфекционный агент выявляется, даже если биоматериала содержится минимальное количество.
к содержанию ↑

Недостатки

Сюда относится:

  • высокая цена (но она колеблется в зависимости от курса доллара и других факторов);
  • бывают ложные результаты (около 10%).

Ложные ответы появляются по разным причинам.

  1. Если сбор урины осуществлялся неверно, были нарушены рекомендации.
  2. Когда работник лаборатории не имеет нужных знаний для проведения анализа или им была нарушена техника исследования материала.
  3. Если в собранную порцию мочи не попали микобактерии.
  4. В моче много сторонних примесей, которые искажают результат (обычно у малышей).

Все вышеперечисленное – повод использовать дополнительные диагностические мероприятия.

к содержанию ↑

Подготовка к анализу

Как сдавать мочу? Чтобы урина не стала причиной неверного ответа, нужно осуществить правильный ее сбор. Немаловажна подготовка.

  1. Если анализ планируется взрослому человеку, то за 1-2 суток до него нужно забыть о половых контактах.
  2. Важно сказать врачу об антибактериальной терапии (если таковая была за последние недели). Нужно выждать не менее месяца и только потом приступать к обследованию. Любые медикаментозные препараты повлияют на результат анализа.
  3. Лучшее время для сбора – утро. Предварительно не допускается употребление пищи и каких-либо напитков.
  4. Половые органы предварительно не обмываются.
  5. Важно приобрести специальный вакуумный набор, в который будет собираться моча. Поместить ее в обычную баночку, а потом перелить не выйдет. Вследствие этого в урину попадут бактерии или вирусы из внешней среды, которые помешают получить достоверный результат. Контакта с внешней средой нужно избегать. Специальный набор состоит из стерильной баночки с крышкой, пробирки и трубки.
  6. В баночку человек опорожняет мочеиспускательный пузырь. Важно собрать первую порцию урины.
  7. После контейнер закрывается и вставляется пробирка. Она наполнится содержимым самостоятельно. Повлияет на это отрицательное давление.
  8. После наполнения пробирки контейнер и трубка утилизируются.
  9. Полученный биоматериал отвозится в лабораторию, где проведут сам анализ. Доставляется только пробирка с имеющейся в ней мочой.

Если обследуемый по каким-то причинам не в состоянии сам собрать мочу, ему придет на помощь специалист из клиники. Специально обученные люди приедут со всем необходимым и сделают все без ошибок.

к содержанию ↑

Как проводится этот анализ?

Проведение ПЦР при туберкулезе проводится в несколько этапов. Рассмотрим каждый детально.

  1. Сначала молекулы ДНК делятся на компплементарные нити путем нагревания до высоких температур.
  2. Потом в полученный материал вводят праймеры. Один их тип комплементарен ДНК 1-ой цепи (ее началу), второй ДНК 2-ой (ее концу). Тут же добавляют состав из четырех типов DDNTP. Далее происходит соединение всех компонентов.
  3. Состав нагревается и в него вводится термостабильная полимераза ДНК. После исследуемые пробы охлаждаются. Все это происходит в термостатах (термальных циклерах).
  4. В конце специалист оценивает полученные результаты. Это делается с использованием специального геля при светящихся лучах ультрафиолета. Электрофореграмму, которую получают, анализируют и результат фиксируют.

Оборудование, с помощью которого проводится анализ дорогостоящее и присутствует не везде.

к содержанию ↑

Расшифровка результатов

Расшифровать результат сможет только квалифицированный специалист. При этом учитывается возраст пациента. Ответ основывается на количестве имеющихся в пробе патогенных микроорганизмов.

Ответа может быть два:

  • положительный;
  • отрицательный.

Положительный значит, что в моче имеются МБК. Это повод либо пройти дополнительную диагностику (при необходимости), либо начинать лечение туберкулеза. У детей обычно бывают ложные результаты, поэтому назначают иные методы обследования, которые подтвердят диагноз.

При получении отрицательного ответа можно быть спокойным, инфицирования нет. При наличии симптоматики, которая говорит об обратном, обследование не заканчивается.

После того, как работник лаборатории расшифровал результат, бумага, на которой указывается ответ, направляется узкому специалисту, тому, кто давал направление на анализ. Фтизиатр изучает данный документ, на основе которого решает, что дальше делать.

к содержанию ↑

Стоимость анализа в разных центрах

Ниже можно ознакомиться с информацией о том, какие приблизительные цены на ПЦР мочи в медицинских лабораториях. Для сравнения представляем три популярных учреждения.

Наименование медицинского центра Адрес Стоимость анализа
Инвитро г. Москва, Алексеевский, Кулаков переулок, 13 365 рублей
Медлайн-сервис г. Москва, Пятницкое шоссе, д. 41 390 рублей
Центр Роса г. Москва, улица Гвоздева, д. 5 564 рубля

Из вышеописанного можно сделать вывод, что стоимость на анализ не превышает 400 рублей. Такая сумма не может остановить больного при необходимости подтверждения диагноза.

Имейте в виду! Иногда в клиниках присутствуют акции и скидки. Следить за ними можно на сайтах лабораторий, узнать в телефонном режиме или не ресепшене в самом офисе.

к содержанию ↑

Вывод

Анализ мочи на ПЦР – методика, которую можно применять всем без исключения. Она не рекомендована малышам, так как результат может быть ложным. Важно правильно подготовиться к анализу и собрать материал. Сбор осуществляется в домашних условиях самостоятельно, допускается помощь специалиста и забор в условиях клиники (при необходимости). Нельзя помещать урину в контейнеры, непредназначенные для анализа. Тут приобретается специальный набор. Проводят саму диагностику квалифицированные работники лаборатории, придерживаясь всех правил. Без наличия дорогостоящего оборудования исследовать урину на ПЦР будет невозможно.

Методика эффективна и способна выявить туберкулез даже тогда, когда количество микобактерий в организме минимально. Но, несмотря на это пробу Манту им заменить нельзя. Подобным способом целесообразно подтверждать диагноз или контролировать, нет ли рецидива.

tuberkulez-info.ru

ПЦР На Микобактерии Туберкулеза: Особенности Проведения

На данный момент существует достаточное количество лабораторных способов определения бактерий Коха. У каждого имеются определенные преимущества и недочеты, например, требуется наличие определенной концентрации клеток в пробе или достаточное время для культивирования.

На данный момент более приемлемым анализом считается ПЦР на туберкулез, который характеризуется высокой результативностью (100%) даже при наличии небольшого количества фрагментов генетического аппарата микобактерий Mycobacterium tuberculosis. Полимеразная цепная реакция дает возможность выявлять ограниченные и диссеминированные формы патогенеза, что важно при обследовании детей, когда микробиологическая диагностика не дала результата.

Кюветы с анализом ПЦР на туберкулез

Что важно знать

Фото палочки Коха (Mycobacterium tuberculosis) под микроскопом

Туберкулез – инфекционное заболевание, вызываемое микобактерией – палочка Коха. Чаще поражаются легкие, но очаги могут быть и в других тканях. Передается респираторно, а также со слюной, кровью, при совместном использовании бытовых приборов и тесном контакте в быту.

Заболевание протекает в двух формах:

  1. Закрытая стадия. Больной при контакте не опасен для окружающих. В мокроте анализы не выявляются признаки возбудителей, ложной будет и ПЦР диагностика на туберкулез. При отсутствии лечения патогенез усугубляется.
  2. Открытая стадия. Палочка Коха присутствует в биологических жидкостях человека, легко диагностируется лабораторными методиками. В таком состоянии человек является опасным для окружающих.

Обратите внимание. Поскольку начало туберкулеза легких протекает латентно, то проводится скрининг. Взрослые люди должны раз в год или два (зависит от региона проживания) проходить флюорографию, которая показывает наличие инфильтрата в тканях. Это дешёвый и быстрый способ диагностики.

На данный момент для выявления опасных микобактерий проводят ряд анализов:

  • методы рентгенографии;
  • КТ или МРТ;
  • туберкулиновые пробы (реакция Манту).

Однако именно анализ крови на ПЦР на туберкулез дает наиболее достоверный результат, причем определяет наличие инфекции вне зависимости от локации очага.

Показания к проведению

Не проходящий кашель один из симптомов, при котором показано обследование на туберкулез

Врач фтизиатр, пульмонолог или терапевт может направить больного на прохождение диагностики при наличии подозрений.

Кроме этого, тест ПЦР на туберкулез требуется, если:

  • возможны внелегочные очаги;
  • наличие признаков бактериемии на фоне туберкулезной инфекции (субфебрилитет, потливость и прочие);
  • при регулярном контакте с инфицированным человеком;
  • при ВИЧ-инфекции;
  • ПЦР диагностика туберкулеза у детей показана при ненормальной реакции на пробу Манту;
  • сильные увеличения лимфоузлов при заболевании нижних дыхательных путей (прикорневые воспаления легких, бронхиты);
  • кровохарканье при этом человек слаб и быстро утомляется;
  • длительный кашель после острых бронхитов и пневмоний.

Что представляет из себя ПЦР

Полимеразная цепная реакция основана на узнавании целых цепочек бактериальной ДНК и РНК или их фрагментов, находящихся в крови пациента или других биологических жидкостях:

  • мокрота;
  • легочные и бронхиальные смывы;
  • моча.

Обратите внимание. Высокая результативность данной методики основана на принципе работы фермента полимеразы (основная функция сборка нуклеиновых молекул). Она может узнавать даже самые мелкие фрагменты генного материала возбудителя. Поэтому результат будет положительный или отрицательный.

Преимущества анализа ПЦР на микобактерии туберкулеза:

  • выявление специфических последовательностей ДНК микобактерий;
  • точность – 98%;
  • чувствительность анализа не менее 100 ДНК-копий в 5 мкл пробе, прошедшей особую обработку;
  • срочный анализ дает возможность получить результат в течение 4 ч., после забора крови.

Использование полимеразной цепной реакции существенно облегчило определение многих заболеваний (не только туберкулеза). Причем метод позволяет регистрировать наличие патогена на самых начальных стадиях патогенеза, когда нет еще никаких признаков. Гарантированность результата обеспечивается благодаря тому, что полимераза среди тысяч клеток может находить по определенному маркеру комплементарные (подходящие) только ей последовательности бактериальных генов или даже их фрагменты.

Помимо этого, ПЦР при туберкулезе помогает выяснить уровень резистентности к назначенной терапии и скорректировать лечение, что в разы повышает его эффективность. Длительность такого анализа три, максимум четыре дня, но при этом врач получает данные, существенно меняющие качество противотуберкулезной терапии. Более подробно обо всех нюансах полимеразной цепной реакции изложено на видео в этой статье.

Методика выполнения

Инструкция проведения анализа на данный момент не представляет особой сложности: сначала проводится отбор исследуемого материала, после чего выделяется ДНК и проводится его классификация по типу патогенной бактерии. Основные моменты указаны в таблице.

Таблица. Как проводится анализ ПЦР на туберкулез:

Действие Комментарий

У пациента берут определенное количество крови, мокроты, мочи или смывы с бронхов.

Полученный материал должен быть на несколько минут нагрет до высоких температур (97º С). Такая мера нужна для расщепления парных молекул нуклеиновых кислот на отдельные цепи (разрыв спирали). Это нужно для того, чтобы полимераза начала работу.

При понижении температуры особая молекулярная структура праймер, ассоциируется с одной из свободных цепей ДНК, что позволит в дальнейшем инициировать сборку новой спирали.

Полимераза начинает сборку новых цепей генома.

Если полимераза нашла нужные бактериальные последовательности и начала сборку, то результат положительный, в противном случае отрицательный.

Для получения достоверного результата, дающего максимальную точность, понадобится проведение около 25–30 циклов, что даст возможность получить необходимое количество копий бактериальных ДНК. При этом они подлежат классификации. Это требует наличия специально оборудованной лаборатории, поэтому не во всех регионах есть возможность проведения ПЦР. Соответственно и цена исследования не является низкой.

В особых случаях данный метод является единственно возможным или крайне необходимым, например:

  • при наличии противопоказаний к другим диагностикам;
  • в спорных ситуациях;
  • при рецидиве туберкулеза;
  • определение стадийности патогенеза.

Заметка. Если анализ ПЦР проводится для человека после противотуберкулезной терапии, то результат может быть ложноположительным. Это связано с наличием в крови очень малого количества мертвых бактерий или они еще находятся на стадии лизиса (клеточной смерти).

ПЦР анализ мочи на туберкулез

Моча, собранная в контейнер для анализа

Суть метода та же, что и при исследовании крови. Однако в данном случае требуется определенный алгоритм сдачи и подготовки. ПЦР мочи поможет выявить микобактерии при наличии очагов в органах выделительной системы и подобрать соответствующую терапию.

Перед забором урины важно хорошо вымыть гениталии. Утреннюю мочу (среднюю порцию) собирают в контейнер и отправляют в лабораторию. Других подготовительных мер не требуется, питание накануне анализа остается без изменений.

upulmanologa.ru

ПЦР диагностика туберкулеза - суть метода, плюсы и минусы

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

Суть метода

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

  • Кровь.
  • Слюна.
  • Мокрота.
  • Выделения из половых органов.
  • Смывная жидкость бронхов.
  • Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

  1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
  2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
  3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-исследование туберкулеза

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

Показания для проведения ПЦР-исследования туберкулеза

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

  • Длительный контакт с больным туберкулезом.
  • Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
  • Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
  • Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
  • ВИЧ-инфекция.
  • Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
  • Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

  • Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
  • Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
  • Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
  • Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
  • Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
  • Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Требования к ПЦР-лаборатории

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

  • Зона приемки и сортировки проб.
  • Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
  • Зона проведения реакционных проб.
  • Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

Плюсы ПЦР-диагностики

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

  • Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
  • Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
  • ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
  • С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
  • Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
  • Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
  • Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
  • ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
  • Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы ПЦР-диагностики

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

  • Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
  • Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
  • При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
  • Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
  • Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

Где пройти ПЦР-исследование на туберкулез

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

tuberculosis.su

Когда и кому назначают анализ мочи на туберкулез

Туберкулезом заражаются независимо от социального статуса, возраста и места проживания. Помимо стандартных методов, таких как туберкулинодиагностика и ФЛГ, для выявления инфекции фтизиатры могут назначить анализ мочи на туберкулез.

Общие сведения

Инфицирование почек занимает второе место по распространенности после легочной формы заболевания. Преимущественно развивается у людей с запущенным поражением легких или костей в результате проникновения инфекции с кровью. Предрасполагает к оседанию бактерий в тканях мочеполового тракта нарушение уродинамики или местного кровообращения.

В норме через здоровые клубочки палочки Коха не проникают. Нахождение этих бактерий в моче становится достоверным признаком туберкулеза, что отличает его от других инфекций, для которых допустимы нижние границы присутствия.

Подготовка к анализам

Требования, которые выполняют перед тем, как сдавать ОАМ (общий анализ мочи):

  • используют полученную сразу после пробуждения среднюю порцию мочи;
  • материал собирают в чистую емкость в количестве 50-100 мл;
  • перед сдачей моют наружные половые органы без использования моющих средств;
  • полученный материал доставляют в лабораторию не позднее 10-11 часов утра (менее 2 часов после сдачи анализа).

Сбор мочи на бактериоскопию и посев проводят по тем же правилам, но более жесткие требования предъявляют к контейнерам для мочи. Они должны быть строго стерильны, поэтому не рекомендуют трогать их внутреннюю поверхность и края, а после наполнения сразу закрывать крышку. До доставки в лабораторию собранный материал хранят в холодильнике.

Перед любым анализом мочи рекомендуют в течение 1-2 дней ограничить употребление в пищу красящих продуктов: моркови, свеклы, черники.

Могут изменить показатели мочи и ее цвет: противотуберкулезные (рифампицин), мочегонные, противовирусные препараты, ацетилсалициловая кислота, витаминно-минеральные комплексы и пр.

Женщинам сдавать анализ необходимо в период отсутствия менструальных кровотечений.

В каких случаях назначают анализ

У туберкулезного поражения почек отсутствуют специфические симптомы, поэтому пациенты длительно, но без стойкого эффекта будут проходить лечение с различными урологическими или гинекологическими диагнозами:

  • циститом;
  • простатитом;
  • пиелитом;
  • пиелонефритом;
  • сальпингоофоритом;
  • мочекаменной болезнью.

Если же у человека уже диагностирована легочная инфекция, то при наличии симптомов поражения мочеполовой системы обязательно проводят анализ мочи на туберкулез почек трижды. Признаки заболевания, указывающие на инфицирование палочкой Коха, включают следующие жалобы:

  • боль в пояснице;
  • дизурия;
  • выделение крови или гноя с мочой.

Исследование мочи при туберкулезе легких преимущественно не определяет каких-либо изменений, а при вовлечении в процесс тканей мочеполовой системы в лаборатории находят отклонения в показателях, которые позволяют заподозрить диагноз туберкулеза:

  • pH меньше 4,0;
  • увеличение количества лейкоцитов и эритроцитов;
  • гвоздевидные лейкоциты в моче;
  • положительная реакция на белок;
  • гной в моче, особенно без бактериовыделения.

По анализу крови также выявляют неспецифичные изменения: анемию, лейкоцитоз. При этих изменениях может понадобиться дополнительное обследование пациента. У мужчин подозрением на туберкулез считают рецидивирующие симптомы поражения простаты, когда затруднено мочеиспускание, железа увеличена или сморщена, длительно выделяется гной или кровь со спермой.

Выявление туберкулеза не исключает его одновременное развитие на фоне других патологий органов мочевыделения.

Определение туберкулезной палочки

При подозрении на инфицирование почек микобактерией специалист назначит комплекс исследований, включая общие анализы крови и мочи, пробу Манту ребенку, рентгенодиагностику, УЗИ, КТ, МРТ. Но безусловным подтверждением наличия инфекции будет положительный анализ мочи на микобактерии туберкулеза.

Для обнаружения возбудителя или его антигенного материала используют следующие способы:

  1. Микроскопию по Цилю-Нильсену. После обесцвечивания материала серной кислотой наносят краску метиленовую синь. Микобактерии туберкулеза при окраске приобретают малиновый цвет и выделяются на фоне синих клеток. Это обусловлено устойчивостью палочек Коха к действию кислот. Чтобы повысить точность определения, рекомендуют забор мочи катетером.
  2. Люминесцентная микроскопия — при окраске ауромином палочки Коха светятся оранжево-желтым цветом. Чувствительность выше, чем при окраске по Цилю-Нильсену.
  3. Бактериологическое исследование — посев мочи на питательную среду (часто используют кровяную или картофельную). Оказавшись в благоприятных условиях палочки начинают размножаться. Но это длительный процесс и может занимать от 20 дней до 3 месяцев. Можно определить резистентность к противотуберкулезным средствам.
  4. Биологическая проба — основана на выявлении микобактерий в тканях морской свинки после подкожного введения ей исследуемой мочи. Это исследование требует времени: свинку усыпляют и препарируют примерно через месяц, если она не умерла ранее. Либо для более ранней диагностики животному проводят туберкулиновую пробу.
  5. Полимеразная цепная реакция — с помощью чувствительных систем выявляются в моче специфичные участки ДНК палочки Коха.

В некоторых случаях проводят провокационную пробу с подкожным введением туберкулина в дозе 20-100 ТЕ или облучением кожи инфракрасным лазером. В первом случае повторные анализы мочи проводят через 24 и 48 часов и сравнивают с первоначальным, во втором — через 10 дней. Положительным считают результат, характеризующийся увеличением количества эритроцитов и лейкоцитов в моче, выделением микобактерий.

Эффективность метода

При туберкулезном поражении почек изменение общего анализа мочи встречается не более чем у 60% пациентов. Выявление микобактерий при бактериоскопии подтверждает диагноз, но специфичность этого метода не превышает 80% (чувствительность при окраске по Цилю-Нильсену — более 100000 микробных тел в 1 мл, а при люминесцентном исследовании — более 10000 в 1 мл).

Более чувствительный посев на среды, но чересчур длительный. Выигрывает перед ними ПЦР на туберкулез:

  • результат получают за 4-5 часов;
  • высокая чувствительность;
  • определяет ДНК микобактерий в моче даже при легочном туберкулезе и отсутствии специфического процесса в почках;
  • возможность определения чувствительности к лекарственным препаратам.

Могут назначить это исследование вместо Манту у детей, если подозревается внелегочной туберкулез, есть аллергия на туберкулин или организм ребенка не вырабатывает антитела на возбудителя при его наличии в организме. Но есть небольшой процент как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов.

Вероятность неверного отрицательного результата возрастает у пациентов, которые длительно лечили заболевания урогенитального тракта антибиотиками. Такие препараты, как фторхинолоны и аминогликозиды, подавляют рост палочек Коха, но не убивают их до конца. Даже если один метод показал отрицательный результат, диагноз туберкулеза остается вероятным, поэтому врачи используют для верификации совокупность анализов и инструментальных исследований.

tuberkulez.pro

Исследование мочи на туберкулёз

При подозрении на внелегочную форму заражения человека Mycobacterium tuberculosis обязательно назначается анализ мочи на туберкулез. Выявление микобактерий позволяет уточнить локализацию инфекции, на основании чего подбирается наиболее эффективная схема терапия болезни. Анализ мочи на определение бацилл Коха проводится разными методами. При возможности больному назначается каждый метод.

Показания к исследованию мочи на туберкулезные микобактерии

При заражении человека микобактериями туберкулеза чаще всего страдает дыхательная система. Но бывает очаг инфекции локализуется в костной системе, тканях головного мозга, костях и мочеполовых органах. Во время проведения диагностики важно определить очаг поражения. Поэтому помимо стандартных методов исследования, таких как флюорография, анализы крови и мокроты пациенту назначается и ряд дополнительных.

Анализ мочи на туберкулез в первую очередь необходим при подозрении на поражения бактериями мочевыделительной системы. Обязательно он должен назначаться больным:

  • При продолжительном и при этом неэффективном лечении воспалительных заболеваний органов мочевыделения – пиелонефрита, цистита, пиелита, простатита, эпидидимита;
  • С нарушением мочеотделения, проявляющимся задержкой мочи, появлением примесей гноя в урине, с гематурией;
  • При длительных необъяснимых болях в области пояснице.

Анализ на туберкулез почек необходим и пациентам уже с установленным поражением бациллами Коха легочной ткани и других внутренних органов. Его своевременное назначение позволит вовремя обнаружить все очаги инфекции и значит, лечение будет наиболее эффективным.

Почечная локализация бактерий туберкулеза характерна для людей трудоспособного возраста. Чаще всего такая форма заболевания определяется у пациентов от 20 до 40 лет. Очень часто туберкулез почек на ранней стадии развития не проявляется явными симптомами. Поэтому нередко диагностируется уже на запущенной стадии. Исключить подобное помогает вовремя назначенный анализ мочи на микобактерии туберкулеза.

Виды исследования мочи на бациллы Коха

Микобактерии туберкулеза при многократном увеличении выглядят как небольшие прямые или слегка изогнутые палочки, их длина доходит только до одной сотой миллиметра. В организме человека они присутствуют там, где происходит их развитие и размножение. Поэтому при туберкулезе почек бациллы будут активно выделяться вместе с мочой. Обнаружить их в анализе можно тремя способами:

  • Бактериоскопическим;
  • Бактериологическим;
  • Биологическим.

Врач может назначить один из перечисленных методов исследования или все сразу. В дополнение к ним обязательно нужно сдать общий анализ мочи. Так как на заболевание указывает не только присутствие бацилл Коха в пробе, но и косвенные признаки.

При проведении специфических анализов мочи на туберкулез нужно учитывать, что положительный результат всегда свидетельствует о поражении микобактериями тканей системы мочевыделения. Тогда как отрицательный результат не всегда может быть достоверным, что может быть связано с неправильным сбором урины и с другими факторами. Поэтому обычно назначается пересдача анализа и дополнительные методы диагностики.

Общий анализ

Проведение общего анализа мочи позволяет выявить косвенные признаки болезни, такие как:

  • Появление гвоздевидных лейкоцитов;
  • Стойкая кислая реакция урины (практически в половине случаев заражения микобактериями);
  • Появление в моче белка (протеинурия);
  • Эритроцитоурия – присутствие крови в моче;
  • Пиурия – гной в урине.

Если результат анализа соответствует вышеперечисленным признакам, пациента обязательно нужно отправить на дополнительное обследование, стандартное при подозрении на туберкулез.

Особенности бактериоскопического исследования мочи

Бактериоскопический анализ мочи иначе называется исследованием по Цилю-Нельсону. В его основе лежит устойчивость микобактерий туберкулеза по отношению к кислой среде урины. Взятый образец обрабатывается в лабораторных условиях определенными реактивами:

  1. Сернокислыми растворами или солянокислым спиртом. Они обесцвечивают неустойчивые к кислой среде бактерии. Тогда как кислотоустойчивые микобактерии туберкулеза оказываются окрашенными, что можно увидеть в микроскоп.
  2. Раствором метиленового синего хлорида. Под его воздействием палочки Коха приобретают насыщенный красно-малиновый оттенок.

Бактериоскопический посев мочи на туберкулез является наиболее быстрым. Используют его не только для обнаружения палочек Коха, но и для выявления других, устойчивых к кислым средам бактерий. Туберкулезные микобактерии при проведении анализа имеют характерный цвет и форму изогнутых или ровных палочек.

На достоверность анализа по методу окраски Циля-нельсона влияет правильный забор мочи. Поэтому все рекомендации врача по отбору пробы нужно неукоснительно соблюдать.

Бактериологическое выявление туберкулезных бактерий в моче

Бактериологическое исследование мочи является наиболее точным методом диагностики туберкулеза почек, но делается такой анализ на протяжении от 2-х до 6 недель. Вначале необходимо на протяжении трех дней подряд сдать анализ мочи, осадок урины помещается в чашку Петри с особой питательной средой, это может кровяная среда или картофельные образцы.

В питательной среде происходит рост болезнетворных микроорганизмов, после чего выявленный возбудитель идентифицируется. В кровяной среде микобактерии туберкулеза начинают расти примерно через семь дней, в картофельной для этого может потребоваться месяц и больше.

По результатам бактериологического анализа принимается решение о проведении дополнительных методов диагностики и назначается специфическое лечение.

Стопроцентно достоверный результат показывает анализ мочи при подозрении на туберкулез почек в виде биологической пробы. Ее проведение заключается во введении осадка мочи в брюшную полость или под кожу подопытному животному со склонностью к заражению болезнью. В лабораторных условиях чаще всего с этой целью используют морских свинок, крыс.

В течение месяца за условно инфицированным животным наблюдают. Если в моче пациента имелись палочки Коха то, как правило, за это время грызун погибает и подвергается исследованию с обязательным определением в организме очагов инфекции. Выявить результат биологической пробы можно и раньше, для этого у животного берут кровь на туберкулин или проводят пункцию лимфоузлов с определением наличия воспалительного процесса.

Биологическая проба назначается пациентам редко, так как не во всех лабораториях возможно ее проведение.

Проба Нечипоренко

Проведение исследования мочи по Нечипоренко по сравнению с общим анализом является более достоверным. Данное исследование дает полную картину о содержании эритроцитов и лейкоцитов в образце урины, определяет количество белковых клеток. Отклонение от нормы не всегда свидетельствует об инфицировании туберкулезом, но точно указывает на инфекционно-воспалительный процесс в мочевыделительной системе. Чтобы определить причину выявленных изменений и установить заболевание пациенту назначаются другие лабораторные методы исследования и инструментальная диагностика.

Правила забора мочи

Моча при туберкулезе покажет присутствие палочек Коха только в том случае, если проба будет взята правильно. Обязательно требуется подготовка, она заключается:

  • В отказе от употребления за 1-2 дня до забора биологической жидкости продуктов, окрашивающих урину. Это свекла, морковка, черника;
  • В исключении использования ряда медикаментов для лечения сопутствующих болезней – диуретиков, жаропонижающих средств, витаминов группы В.

Если лечение ранее диагностированной болезни не предполагает перерыв в приеме медикаментов, нужно сообщить об этом врачу. Также нельзя накануне пить спиртные напитки, желательно воздержаться и от курения. Для выявления микобактерий необходим чистый образец урины, поэтому женщины в период менструаций сдавать анализ не должны.

Чтобы точно установить заболевание с поражением почек необходима утренняя порция мочи. Собирают ее, следя нескольким правилам:

  • Заранее нужно подготовить емкость с крышкой — специальные баночки для проб продаются в аптеках;
  • Область половых органов тщательно подмыть и лучше делать это без мыла;
  • Собрать среднюю порцию мочи. То есть мочеиспускание начать в унитаз, затем струю направить в баночку и затем вновь в унитаз. Для исследования достаточно 50 мл урины;
  • Емкость сразу закрыть завинчивающейся крышкой и поставить в прохладное место.

В большинстве случаев образец мочи на микобактерии туберкулеза собирается дома. Но его необходимо как можно раньше увести в лабораторию. В «свежей» урине палочки Коха определяются легче и поэтому результат таких анализов редко бывает ложноотрицательным.

Общие принципы диагностики

Туберкулез – заболевание, трудно поддающееся диагностики на ранней стадии. В России повсеместно распространена проба Манту, ее начинают проводить с раннего возраста. Но она не всегда дает точные результаты, поэтому необходимы и другие анализы. На начальном этапе диагностики назначают флюорографию и анализ крови. Если при их проведении возникает подозрение на туберкулез, пациента отправляют на расширенное обследование, в него входит:

  • Рентгенография;
  • Туберкулиновые пробы;
  • МРТ;
  • Анализ крови по методу ПЦР и ИФА;
  • Анализ мокроты.

Практически со стопроцентной точностью болезнь устанавливает анализ ПЦР, но он дорогой и проводится не во всех лабораториях.

Флюорография, исследование мокроты являются достоверными, если очаг поражения локализуется в бронхолегочной системе. При внелегочных формах заболевания их результаты не точны, поэтому диагноз выставляется только после расширенного обследования, включающего и проведения анализа мочи.

Диагностические исследования, направленные на выявление туберкулеза, повсеместно распространены. Но к сожалению в большинстве государственных учреждений используются только устаревшие методы, которые не всегда определяют микобактерии при их присутствии в организме. Чтобы получить точные результаты можно обратиться в современные медцентры. Анализы в них в зависимости от их вида проводятся как платно, так и бесплатно.

Если вам известно что-либо новое об исследовании на туберкулез, напишите пожалуйста в комментариях, это может пригодиться многим людям. Желательно поделиться статьей и в соцсетях, так как не все знают, что существуют другие способы обследования, помимо стандартной флюорографии.

chahotkinet.ru

ПЦР на туберкулез: диагностика, анализ крови, вместо Манту ребенку, тест мочи, мокроты

В случае подозрения на заболевание лучше сразу сдать анализ ПЦР на туберкулез. Во время этого исследования берется кровь, которая проверяется под микроскопом. Полимерная цепная реакция все чаще стала заменять пробу Манту, чтобы выявить туберкулез.

Преимущества метода

Данный анализ уже через несколько часов определяет наличие возбудителя. Кроме того, если в организме будет присутствовать малое количество бактерий, данный метод все равно сможет их выявить.

Основным достоинством теста ПЦР являются следующие положительные моменты:

  1. Болезнь выявляется в 100% случаев.
  2. Специфичность ДНК МБТ высока.
  3. Анализ выявляет возбудителя за 4-4,5 часа.
  4. Успешно диагностируется туберкулез легких, с чем не могут справиться другие методы.
  5. Возможность выявления определенного фрагмента, который содержится в данном возбудителе.

Полимерная цепная реакция дает возможность не только своевременно выявить возбудителя и начать лечение больного, она позволяет вовремя изолировать человека от общества в случае заражения. Палочка Коха — возбудитель туберкулеза — может находиться в организме где угодно. И лишь ПЦР анализ позволяет выявить ее в месте нахождения.

Исследование ПЦР также дает возможность подобрать лекарственный препарат в зависимости от чувствительности микроорганизмов.

Описание болезни

В ХIХ веке туберкулез называли чахоткой. Болезнь представляет собой инфекционное поражение внутренних органов, преимущественно легких. Туберкулез передается воздушно-капельным путем при чихании и кашле. Объектом заражения может быть как человек, так и животное.

После проникновения бактерий туберкулеза в организм болезнь длительное время может протекать в скрытой форме.

В зависимости от степени воздействия заболевшего человека на окружающих различают 2 формы заболевания:

  1. Закрытая форма туберкулеза. Она не является опасной, т.к. человек не может заразить окружающих. Даже в анализах, в т.ч. и ПЦР, микобактерии заболевания не выявляются. Но все же опасность при данной форме присутствует, т.к. в любой момент закрытая форма может перейти в открытую. Такая активная форма туберкулеза может быть опасна не только для самого больного, но и для окружающих.
  2. Открытая форма инфекции. При ней в биологических жидкостях человека выявляется палочка Коха. Больной туберкулезом на этой стадии несет особую угрозу для окружающих. Заразиться можно даже в том случае, если носитель тщательно следит за собой в плане гигиены.

К наиболее распространенным методам исследований, проводимых для выявления болезни, относятся:

  1. Флюорография.
  2. Томография грудной клетки или других пораженных мест.
  3. Рентгенографическое исследование.
  4. Исследование биологических материалов больного.
  5. Туберкулиновая проба (Манту).

К наиболее эффективным способам выявить палочку Коха относится молекулярно-генетический анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР диагностика туберкулеза.

Исследование на туберкулезную инфекцию

Полимеразная цепная реакция — это наиболее точный молекулярно-генетический анализ. Если произошло заражение туберкулезной инфекцией, полимерный тест исследования позволяет точно выявить ДНК или РНК возбудителя болезни. Для этого необходимо сдать кровь или другую биологическую жидкость.

Чтобы определить наличие туберкулеза, достаточно минимального количества бактерий, подойдет даже 1 клетка.

К другим преимуществам ПЦР диагностики относятся следующие:

  1. При проведении данного анализа используется особый фермент, благодаря которому выявляется точное присутствие туберкулезной инфекции.
  2. Анализ ПЦР особо чувствителен к микобактериям инфекции, поэтому точность диагностики приравнивается почти к 100%.
  3. Уже через 3,5-5,5 часов после того, как тест проведен, можно будет узнать результаты анализов.

При таком заболевании, как туберкулез, очень важно выявить патологию на ранних ее стадиях. Поэтому тест на полимеразную цепную реакцию является наиболее информативным в этом случае. Когда бактерии только начинают атаковать, следует выявить их как можно раньше, пока их воздействие не затронуло жизненно важные функции внутренних органов.

Анализ ПЦР имеет еще 1 преимущество перед другими видами исследования: методика определяет чувствительность микроорганизмов к тому или иному лекарственному препарату, что позволяет терапии быть наиболее эффективной.

Подготовка к сдаче анализов на ПЦР

Если сдается слюна, то требуется подготовка к этому. За 12 часов перед процедурой необходимо отказаться от курения, алкоголя, приема лекарств и еды. Чистка зубов, полоскание рта различными освежителями и даже применение зубной нити запрещены. Также нельзя использовать губную помаду и жить половой жизнью. Следует ополаскивать ротовую полость кипяченой водой.

Не только туберкулез выявляется при помощи метода ПЦР. Тем же способом можно обнаружить и такие не менее серьезные недуги, как герпес, хламидии, мононуклеоз, пневмонию, бароллеоз, ВИЧ, гепатит, краснуху.

Чаще всего берется кровь из вены, но в некоторых случаях может понадобиться совершенно другой биологический материал:

  1. Слюна.
  2. Анализ мочи.
  3. Соскоб из любой части тела.
  4. Половые выделения.
  5. Кал.
  6. Спинномозговая жидкость.
  7. Взятие мокроты из бронхов при отхаркивании.
  8. Анализ слизи.

Но самым информативным методом ПЦР все-таки является анализ крови на туберкулез.

Сбор биоматериала

Несмотря на то что процедура выявления возбудителя по методу ПЦР занимает всего 4-4,5 часа, она относится к наиболее сложным видам диагностики. Многие факторы могут повлиять на точность результатов. Например, собирать образцы на исследование необходимо по определенным правилам. Основным из них является повышенная стерильность при сборе биологического материала. Поэтому данный анализ сложно проводить маленькому ребенку.

Если берется образец в качестве крови из вены, то специалист проводит анализ крови на ПЦР на туберкулез не только стерильным шприцем, но и по всем правилам соблюдения общей гигиены.

Кровь собирается в специальную пробирку и на протяжении всего исследования хранится в таких условиях, которые препятствуют ее свертываемости.

Если это анализ ПЦР мочи на туберкулез, то жидкость собирается рано утром, когда человек только проснулся. Перед походом в туалет больной принимает душ и после этого берет стерильную емкость для сбора урины.

В случае взятия соскоба с половых органов, как у женщин, так и у мужчин, вся процедура проводится в условиях медицинского учреждения.

Существуют и более сложные анализы, например взятие жидкости из спинного мозга. В этом случае все действия проводятся в условиях стационара опытными врачами.

Чаще всего прохождение анализа полимерной цепной реакции назначается в таких случаях:

  1. Чтобы диагностировать болезнь в легочной ткани.
  2. Чтобы выявить источник заболевания.
  3. Чтобы определить болезнь за пределами легких.
  4. С целью диагностики рецидивов болезни.

Последовательность выполнения теста

Диагностика туберкулеза у детей и взрослых при помощи полимерной цепной реакции проходит следующие этапы:

  1. В определенных ситуациях берется различный материал на исследование. Это может быть кровь, мокрота или промывная жидкость из бронхов.
  2. После этого взятый биологический материал в течение определенного времени (чаще всего это несколько минут) подвергают воздействию высоких температур (до +97°С). В результате разрушается первоначальная структура ДНК микроорганизма, которая состоит из 2 цепей.
  3. После этого температура начинает снижаться, это действие называется отжигом. В это время праймер соединяется с 1 из разъединенных цепей.
  4. В завершение проводится элонгация. Во время нее происходит необходимый биологический синтез существующих молекул.

Понадобится 25-30 циклов, чтобы получилось необходимое количество копий ДНК на микобактерии туберкулеза.

Для процедуры необходимо дорогостоящее оборудование, поэтому не во всех медицинских учреждениях имеется возможность проводить тест ПЦР на туберкулез вместо Манту.

Благодаря прививкам и исследованию ПЦР (вместо Манту) можно предотвратить развитие такого опасного недуга, как туберкулез. Теперь не понадобится дожидаться начала проявления болезни или делать снимки на рентгеновском аппарате. Если появляются подозрения на инфицирование, для исключения страшных последствий болезни всегда можно сделать тест ПЦР, который с максимальной точностью определяет состояние организма. В условиях реального времени такие формы диагностики, как проба Манту и флюорография, постепенно отходят на второй план по сравнению с методом ПЦР.

tuberkulez.pro

Расшифровка результатов ПЦР на туберкулез - Первый по туберкулезу

Оглавление: [скрыть]

  • Что такое ПЦР диагностика
  • Ответственность перед сдачей анализов
  • Процесс сбора анализов
  • Как расшифровываются результаты

В последнее время ПЦР на туберкулез считается наиболее точным анализом, хотя и существуют другие методы. Данное заболевание набирает обороты, поэтому специалисты стараются изобрести новые технологии по выявлению палочки Коха в организме. Всем известно, что туберкулез является инфекционной болезнью, которая может передаваться как воздушно-капельным путем, так и через насекомых и т.д. поэтому крайне важно проводить периодические обследования.

Что такое ПЦР диагностика

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет всего в течение нескольких часов обнаружить возбудителя инфекции, причем выявить можно даже 1-2 молекулы среди огромного количества. Данный тест имеет массу достоинств, которые проявляются в следующем:

  • 100%-ное выявление, так как в биологической пробе определяется от 10 до 100 клеток;
  • специфичность ДНК МБТ является очень высокой;
  • скорость анализ имеет от 4 до 4,5 часа;
  • диагностика туберкулеза легких, что практически нереально для других методов;
  • выявляется особенный фрагмент, который имеется только в конкретном возбудителе.

С помощью этой диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека и назначить ему соответствующее лечение. Особенно это касается туберкулеза, потому что точное расположение палочки Коха выявить проблематично. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к определенному медицинскому препарату, тем самым определяется метод лечения. Чтобы провести полимеразную цепную реакцию на устойчивость, используют гены, запоминающие невосприимчивость к некоторым лекарствам, после чего через двое суток можно получить результат. Это благотворно сказывается на профилактике заболевания.

Вернуться к оглавлению

Следует отметить, что ПЦР выявляет возбудителей не только туберкулезной палочки, но и многих других заболеваний и даже ВИЧ. Анализ проводится с любой биологической жидкостью. Это могут быть:

  • кровь;
  • моча;
  • кал;
  • выделения половых органов;
  • мокрота;
  • жидкость спинномозговая;
  • соскоб со всех органов.

Собранный материал помещается в специальный амплификатор, то есть реактор, где находятся некоторые ферменты, благодаря которым идет цепная реакция по удвоению ДНК инфекции. После этого производится расшифровка. Результат, как правило, бывает либо положительный, либо отрицательный.

Назначается диагностика туберкулеза в тех случаях, когда, во-первых, существуют основные симптомы болезни, во-вторых, человек очень длительное время болеет острыми заболеваниями дыхательных путей и, в-третьих, люди контактируют с больными туберкулезом. Но врач может провести данный анализ и при наличии сомнительных снимков после рентгенологического обследования.

На полимеразную цепную реакцию могут направить такие специалисты, как пульмонолог, фтизиатр, терапевт, а детей — педиатр. Конечно, есть правила, которые необходимо соблюдать пациенту перед сдачей, например, крови на туберкулез. Прежде всего, нельзя употреблять пищу за 4-5 часов до сдачи, а за сутки до этого нужно исключить из своего рациона жирные и аллергенные продукты. Также желательно не использовать антибиотики и личные средства гигиены в виде гелей.

Вернуться к оглавлению

Но не только больной обязан соблюдать необходимые условия. То же относится и к врачам. Чтобы забор анализов на туберкулез был проведен правильно, нужно делать это только в стерильных условиях, иначе в жидкую среду могут попасть другие микроорганизмы, следовательно, интерпретация будет неверной. Все инструменты, приборы и контейнеры тоже должны быть в стерильном виде.

Итак, материал собирается в специальные контейнеры, которые при необходимости специалист дает пациенту. Например, моча собирается только первая после пробуждения человека утром. Но при этом необходимо провести утренние водные процедуры в соответствующих местах. Мочи для сбора достаточно от 20 до 30 мл. А вот синовиальную жидкость из спинного мозга и прочие сложные анализы берет только высококвалифицированный специалист, находящийся в стационарных условиях.

У женской половины человечества мазок берет только гинеколог на специализированном кресле, а у мужчин соскоб или мазок забирается из мочеиспускательного канала (из наружной части). Из зева мазок берет врач специальной лопаткой или другими инструментами. Кровь берется непосредственно из вены стерильными шприцами.

На последнем этапе сбора доктор с учетом всех требований транспортировки и хранения направляет образец в специальную лабораторию для дальнейшего исследования. Для этого персонал лаборатории помещает кровь или прочие мазки в пробирку, в которую заблаговременно добавлено вещество, препятствующее преждевременному старению образца.

В случае с кровью, что особенно важно, данное вещество не позволяет ей свернуться, следовательно, наличие сгустков исключено. Пробирки при этом не встряхиваются, так как можно повредить состояние эритроцитов. Это все нужно для того, чтобы легче и быстрее было определить все компоненты крови.

Потом кровь на туберкулез центрифугируют, чем отделяют от плазмы клеточный осадок, который и изучается под микроскопом. Изучив первоначальные данные, добавляют фермент (транскриптазу) и при определенном температурном режиме проводят следующую цепную реакцию. Благодаря этому образуются фрагменты генетического материала, которые и подвергаются расшифровке.

Вернуться к оглавлению

Не всегда анализ бывает правдивым. Ложноположительный результат бывает только в том случае, если не соблюдены все требования по подготовке и сдаче мазков и т.д. Именно поэтому следует как пациенту, так и врачам строго придерживаться всех правил, о которых говорилось выше.

Расшифровка может быть как простой, так и сложной. К первой относится определение «отрицательно» или «положительно», что свидетельствует о том, что при отрицательной расшифровке пациенту не о чем беспокоиться, т.к. инфекций не обнаружено.

При положительных результатах простой формы количество содержащихся возбудителей является ничтожно малым. Дело в том, что в медицине существуют определенные нормы, благодаря которым можно определить степень устойчивости к заболеваниям.

Но в сложной расшифровке теста определяется конкретное содержание тех или иных микроорганизмов, что позволяет сделать самые точные выводы. Естественно, ни один пациент не сможет самостоятельно расшифровать все эти цифры, а врач способен подробно объяснить больному.

Именно эти цифры показывают, где расположены очаги, на какой стадии находятся и что является причиной возникновения заболевания туберкулезом.

На основании расшифровки специалисты назначают метод лечения и пр. Никогда не стоит забывать о том, что малейшее наличие возбудителей свидетельствует об их присутствии в организме. Поэтому рано или поздно инфекция может распространиться дальше и стадия туберкулеза увеличится. Не следует безответственно относиться к собственному здоровью, всегда следуйте рекомендациям специалистов.

1tuberkulez.ru


Смотрите также